Sistem închis de imagistică fluorescentă GFP/Chl. FluorCam

FluorCamSistemul închis de imagistică fluorescentă GFP/Chl. poate servi o gamă largă de cercetări moleculare și celulare aplicate proteinelor fluorescente verzi. Sistemele închise de imagistică cu fluorescență includ roți de filtre complet controlate de software și cu acționare electrică, precum și o serie de seturi de filtre pentru detectarea și imagisticarea GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP sau a altor proteine fluorescente și fluorescente în bandă.

Sistemul închis de imagistică fluorescentă GFP/Chl. FluorCam poate fi, de asemenea, utilizat pentru a detecta schimbările dinamice și distribuția spațială a fluorescenței clorofilice emise de plante, pentru a măsura procesul Efectul Kautsky, extinderea fluorescenței și alte procese de fluorescență temporară (transientă) și pentru a furniza imagini fluorescente 2D. Configurarea hardware-ului special concepută permite transformarea automată a sistemului în imagini cu fluorescență de proteine, fluorescență sau fluorescență de clorofil. Sistemul este foarte integrat și poate face adaptarea întunecată a eșantioanelor.

Domeniul de aplicare:

Detectarea fluorescenţei proteinelor şi fluorescenţelor

Transferul de gene și tehnologia biosenzorilor

• Cercetarea plantelor modificate genetic

• Testarea rezistenței la diferite genotipuri

• Studiul interacțiunilor plante-microbiologice

• Studiul interacţiunilor plante-animale

· Proprietăți de fotosinteză a plantelor și screening tulburări metabolice

Detectarea forței biologice și non-biologice

Studii privind capacitatea sau sensibilitatea plantelor la coerciție

• Studii de inegalitate a porelor

• Cercetarea haosului metabolic

• Evaluarea capacității și a producției

Caracteristici:

· Operare ușoară, reglabilă la înălțime eșantionul de măsurare, integrată cu cutie de adaptare întunecată dedicată, pentru a facilita manipularea și operarea întunecată a plantelor testate.

CCD de înaltă rezoluție, cu o rezoluție de până la 1392 x 1040 pixeli, pentru captura rapidă și precisă a fluorescenței clorofilice și a GFP

· Măsurarea automată a imaginii repetată poate fi efectuată, poate fi setată o măsurare automată a imaginii ciclice a unui program experimental (Protocole), datele de măsurare a imaginii sunt depozitate automat în calculator în funcție de data și ora (cu ștampilă de timp)

• Cu diferite proceduri experimentale generale (protocole), cum ar fi efectul de inducre Kautsky, analiza de stingere fluorescentă și altele, mai mult de 50 de parametri de măsurare a analizei

Modulul de imagini color TetraCam opțional cu o suprafață de imagini maximă de 20 x 25 cm pentru analiza morfologiei frunzelor sau plantelor

Eșantioane tipice:

• Frunze, tulpini, semințe, rădăcini, plante întregi

• Tesutul rănit, răsaduri mici în vasul Petri

• Fructe şi flori

• Bacterii albastre, alge verzi, bacterii

• Animale modificate genetic

Parametrii tehnici:

• Parametrii de măsurare: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Mai mult de 50 de parametri de fluorescență clorofilă, fiecare parametru poate afișa o imagine colorată fluorescentă 2D

• Protocol complet de măsurare automată, care permite editarea liberă a programului de măsurare automată

a) Fv/Fm: parametrii de măsurare includ Fo, Fm, Fv, QY etc.

b) Efectul inducut de Kautsky: Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd și alți parametri de fluorescență

c) Analiza de stingere fluorescentă: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL și mai mult de 50 de parametri

d) Curba de răspuns la lumină LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR și alți parametri de fluorescență

e) Absorbția PAR cu NDVI (opțional)

f) Dinamica oxidativă (opțională)

g) Măsurări cu imagistică fluorescentă statică, cum ar fi GFP

h) Analiza dinamică rapidă a fluorescenței OJIP (opțional): Mo (înclinația inițială a curbei OJIP), zona fixă OJIP, Sm (măsurarea energiei necesare pentru închiderea tuturor centrelor de reacție luminoasă), QY, PI și alți 26 de parametri

Senzor de înaltă rezoluție TOMI-2 CCD

a) Scanare treptată CCD

b) Rezoluția maximă a imaginii: 1360 x 1024 pixeli

c) Rezoluție temporală: până la 20 de cadre pe secundă la rezoluția maximă a imaginii

d) Rezoluţie de conversie A/D: 16 biţi (65.536 scări de gri)

e) Dimensiuni imagini: 6,45 μm x 6,45 μm

f) modul de funcționare: 1) modul video dinamic pentru măsurarea parametrilor fluorescenței clorofilii; 2) Mod snapshot pentru măsurarea proteinelor fluorescente și a coloranților fluorescenți, cum ar fi GFP

g) Mod de comunicare: Gigabit Ethernet

• Plăci de sursă de lumină: 4 bucăți mari de înaltă intensitate ambalaj LED-uri, fiecare plăci de sursă de lumină este formată din 8 × 9 LED-uri, suprafața efectivă a plăcii de sursă de lumină este aceeași suprafață de imagini de 13 × 13cm

• Lumină de măsurare: lumină roșie standard de 617nm, opțională în alte benzi, durată reglabilă de 10µs-100µs

• 2 lumină roșie (617nm) + 2 lumină albastră (470nm), intensitatea luminoasă maximă Actinic1 300 µmol (fotoni) / m².s, intensitatea luminoasă maximă Actinic2 2000 µmol (fotoni) / m².s; Lumina fotochimică maximă poate fi actualizată la 3000 µmol (fotoni) / m².s

• Lumină saturată: intensitate luminoasă maximă 4000 µmol (fotoni) / m².s, poate fi actualizată la 6000 µmol (fotoni) / m².s

• Suprafața imaginii: 13 x 13 cm, pentru analiza imaginii a frunzelor de plante, țesuturilor vegetale, algelor, mușchii, mantelelor, plantelor întregi sau mai multe plante, 96 de găuri, 384 de găuri etc.

• Modul de măsurare a GFP: roți de filtru cu 7 biți și filtre speciale pentru măsurarea GFP (proteină fluorescentă verde)

• Modul de măsurare a absorbției PAR (opțional): Lumină roșie îndepărtată 740nm (FAR), LED-uri bicolore 660nm și filtre speciale pentru măsurarea absorbției PAR și NDVI

• QA în analiza de imagini oxidative (opțional): poate fi efectuată o măsurare în analiza de fluorescență STF cu o lumină de până la 120.000 µmol (fotoni) / m².s în 100 µs

• Modulul de dinamică rapidă a fluorescenței OJIP (opțional): cu o rezoluție de timp de până la 1 µs, curba OJIP poate fi măsurată și analizată cu peste douăzeci de parametri conexi, inclusiv: Fo, Fj, Fi, P sau Fm, Vj, Vi, Mo, Area, Fix Area, Sm, Ss, N (numărul de rotații reduse de QA), Phi-Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (fluxul cuantic de absorbție a luminii în centrul de reacție unitar), TRo/RC (fluxul cuantic de captură inițială a luminii în centrul de reacție unitar), ETo/RC (fluxul cuantic de transmitere inițială a electronilor în centrul de reacție unitar), DIo/RC (pierderea energiei în centrul de reacție unitar), ABS/CS (fluxul cuantic de absorbție a luminii în secțiunea de eșantion unitar), TRo/CSo, RC/CSx (densitatea centrului de reacție), PIABS (indicele de „performanță” sau indicele de supraviețuire bazat pe fluxul cuantic de absorbție a luminii), PIcs (indicele de „performanță” sau indicele de supraviețuire bazate pe secțiune)

• Placă de sursă de lumină UV LED (opțional): 365nm sau 385nm, 1) Măsurarea fluorescenței multicolore (a se vedea sistemul de imagini cu fluorescență multispectrală FluorCam pentru detalii); 2) Măsurarea wtGFP (proteină fluorescentă verde de tip sălbatic), DAPI (4',6-dioxid-2-fenilpiper, un colorant fluorescent)

• Placă de sursă de lumină LED albastru (opțional): 470nm, 1) măsurarea EGFP (proteină fluorescentă verde îmbunătățită); 2) pentru cercetarea funcției porelor

• Sursa de lumină LED verde (opțional): 530nm, măsurarea YFP (proteina fluorescentă galbenă)

* Măsurarea proteinelor fluorescente sau a coloranților fluorescenți, cum ar fi wtGFP, DAPI, EGFP și YFP necesită, de asemenea, un filtru corespunzător

• FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam FluorCam

• Protocole personalizate pentru clienți: poate fi setat timpul (cum ar fi durata de măsurare a luminii, durata de măsurare a luminii fotochimice, timpul de măsurare etc.), intensitatea luminii (cum ar fi intensitatea luminii fotochimice diferite, intensitatea sclipirii saturate, modularea măsurării luminii etc.), cu limbaj și script de program experimental dedicat, utilizatorul poate crea noi programe experimentale liber folosind șabloanele wizardului din meniul Protocol

• Analiza automată a măsurărilor: poate fi setat un protocol pentru măsurarea automată a imaginii fără supraveghere, numărul de repetări și intervalul de timp personalizat de client, datele de măsurare a imaginii sunt depozitate automat pe computer în funcție de data și ora (cu ștampilă de timp)

  Modul snapshot: prin intermediul modului de imagini snapshot, puteți regla liber intensitatea luminii, timpul de obturator și sensibilitatea pentru a obține imagini clare cu fluorescență stabilă și instantaneă a mostrelor de plante

• 

• Pre-procesare a imaginilor: software-ul de programare recunoaște automat mai multe eșantioane de plante sau mai multe zone și poate selecta manual regiunea de interes (ROI). Forma selecţiei manuale poate fi pătrată, rotundă, poligonală sau sectorială. Software-ul poate măsura și analiza automat curba dinamică fluorescentă și parametrii corespunzători pentru fiecare eșantion și zonă selectată, cu un număr nelimitat de eșantioane sau zone (>1000)

• Modul de analiză a datelor: cu modul "semnal de calcul remediere" (medie aritmetică) și modul "semnal de calcul remediere", în cazul raportului semnal-zgomot mare, alegeți modul "semnal de calcul remediere" în cazul raportului semnal-zgomot scăzut pentru a filtra erorile provocate de zgomot

• Rezultatele de ieșire: diagrame dinamice de fluorescență cu rezoluție înaltă în timp, video cu schimbări dinamice de fluorescență, fișiere Excel cu parametri de fluorescență, histograme, diagrame de imagini cu parametri diferiți, liste cu parametri de fluorescență cu ROI diferite și altele.

• Lățimea de bandă a detectorului CCD: 400-1000 nm

· Sistemul de iluminare: static sau dinamic (sinus)

Răspuns spectral: eficiență cuantică maximă (70%) la 540 nm și scadere de 50% la 400 nm și 650 nm

Zgomot de citire: sub 12eRMS, tipic 10e

Capacitate deplină: mai mare de 70.000 e (unbinned)

Bios: firmware-ul poate fi actualizat

• Modalitate de comunicare: Gigabit Ethernet

Dimensiuni: 471 mm (L) × 473 mm (D) × 512 mm (H)

Greutate: aproximativ 40 kg

Putere de intrare: aprox. 1100 W

Tensiunea de alimentare: 90-240 V

Aplicații tipice:

Institutul de Științe ale Vieții din Shanghai a folosit FluorCam pentru a măsura imaginile obținute de GFP, în care plantele care emit o culoare strălucitoare sunt plantele care exprimă GFP.

Analiza de imagistică NDVI și GFP de contractie-expansiune în diferite faze (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) (Miguel, 2014)

Origine: Europa